ReproHepato Human iPS Cell-derived Hepatocytes 人類iPS細胞衍化之肝細胞

Reprocell
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ReproHepato image

細胞層級的高通量篩檢系統,有助於早期藥物開發階段,快速評估上千種化合物特性。然而,這樣的篩選通常依賴於高度增殖或癌變的細胞株,在正常人類細胞中不一定能準確顯示出受影響的化合物。初代細胞(primary cell)的使用相當常見,但是它們有使用的限制且批次間變異性大。

人類iPS細胞是一個有可靠的正常人類細胞的來源,因為iPS細胞具有自我更新潛能和多能性分化能力,幾乎可分化成任何類型的體細胞。ReproCELL建立了專有技術,以提供人類iPS細胞來源的肝細胞(ReproHepato),無數量限制地生產高品質、完全分化的肝細胞,使得高通量篩選僅有微小的批次變化。

ReproCELL肝細胞優點

  • 全球第一個商品化,從iPS細胞衍化出具有CYP活性的人類肝細胞
  • 對照組為初代細胞(primary cells)時,有穩定的CYP活性和誘導力(3A4/1A2/2C9/2C19)測試結果,培養中細胞壽命長
  • 細胞為已分化細胞,使用套組中的Maitenance Medium培養六天後,該細胞則可進行CYP assay試驗
  • 細胞需儲存於-80℃,液態氮可能會降低其活性
  • 帶有高活性CYP22D6P的產品已被研發生產
  • 另提供CYP assay合約式檢測服務

人類iPS細胞衍生之肝細胞 : 高純度且具有CYP活性

ReproHepato細胞帶有典型的人類肝細胞外型和特徵,表現肝細胞組織專一性蛋白,如CYP3A4、HNF4a、E-cadherin,或高比例的白蛋白(albumin) 。

ReproHepato BE

明視野影像

ReproHepato PAS

PAS 染色:顯示肝醣囤積

ReproHepato Immune

免疫染色 :
G / E-cadherin
R / HNF4a

ReproHepato FACS CYP3A4

流式細胞儀分析: CYP3A4(+)細胞

ReproHepato FACS Albumin

流式細胞儀分析:帶有白蛋白細胞

穩定的CYP和誘導力測試結果

ReproHepato CYP3A induction inhibition

如同原代肝細胞,CYP3A4的活性是通過典型的誘導劑和抑製劑以劑量效應的方式調控,其他CYP細胞色素(1A2/2C9/2C19)的活性和誘導力,被觀察到具有和原代肝細胞相同水平的反應。現在正開發中即將推出的ReproHepato版本中,還觀察到CYP2D6活性。

更穩定的實驗結果 : 批次間差異小

相較於初代肝細胞(primary hepatocytes),ReproHepato肝細胞在CYP活性和誘導力測試中,批次間差異較低,品質穩定。

ReproHepato comparison 3A4 absolute

利用冷光(luminescence)進行 基態和rifampicin誘導CYP3A4活性測試

ReproHepato comparison 3A4 ratio不同批次肝細胞CYP3A4活性變化比較

ReproCELL肝細胞

產品貨號 產品名稱 產品數量 產品分類
RCDH001N ReproHepato Human iPS Cell-derived Hepatocytes 8.25×106 cells/vial (frozen cells, for plating one whole 96-well plate)  Kit
RCDH101 ReproHepato Culture Medium Basal medium: 80 mL Supplement: 400 µL  Reagents
RCDH301 ReproHepato Assay Medium  Reagents
RCESDH401 CYP Assay Service  Reagents

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